Fot og munn sykdom virus-o antistoff elisa-sett

Spesifikasjon

FMDV-O AB ELISA

Tiltenkt bruk: Bovine fot- og munnsykdomsvirus-O

Antistoff ELISA -deteksjonssett er for bestemmelse av fot- og munnantistoff i Bovines serum in vitro. Testen brukes til å vurdere fot- og munn sykdomsvirus type o antistoff immunitetsstatus for gårder.

Eksemplar: serum

Materialer som kreves, men ikke gitt:

Renset vann

Pipettor

96- brønn mikroplateleser (450nm)

Timer

Sentrifuge (4000 rpm)

Vaskemaskin

Ovn (37 grader)

Testprosedyrer og tolkning

Trinn 1 Testprosedyre

1.1 Vaskeløsningsforberedelse

WOrkingskonsentrasjon wAshing væske:Før bruk skal vaskeoppløsningen gjenopprettes til romtemperatur (20-25 grad) og ristet jevnt for å gjøre den ensartet. Fortynn 20 ganger den konsentrerte vaskeoppløsningen med renset vann (for eksempel tilsettes 5 ml konsentrert vaskingløsning til 95 ml renset vann), bland godt, og den fortynnede vaskevæsken kan lagres ved 2-8 grad i 7 dager.

1.2 Prøveforberedelse

① Hele dyreblod ble tatt, sentrifugert ved 4000 o / min i 10 minutter, og supernatanten ble samlet. Serum kan også koaguleres naturlig uten hemolyse.

② Fortynn serumprøven 1:25 (tilsett 5ul serumprøve til 120UL -prøvefortynningsmiddel) og bland grundig.

Merk: Negative og positive kontroller trenger også fortynnet.

1.3 Enzymkonjugatforberedelse

Fortynn enzymkonjugatet 1:90 (tilsett 5ul -enzymkonjugat (X100) til 445UL prøvefortynningsmiddel) og bland grundig.

1.4 Testprosedyre

① Ta enzymetiketten mikroplat (i henhold til antall prøver, kan demonteres og brukes flere ganger), tilsett 100ul av det fortynnede serumet i enzymetiketten mikroplat, sett to brønner hver for negative og positive prøver, og tilsett 100ul hver for negativ og positive kontroller til henholdsvis reaksjonen. Rist prøven forsiktig i brønnen, ved å bruke tetningsplatefilmen for å dekke platen, og inkuberes ved 37 grader i 30 minutter.

Åpne tetningsplatefilmen, rist av løsningen i platen godt, tilsett 300 ul arbeidskonsentrasjonsvæske til hver brønn, og kast deretter væsken i brønnen. Gjenta trinnene ovenfor 5 ganger, og klapp til slutt tørr på et rent absorberende papir.

Bad 100 ul enzymkonjugat til hver brønn, dekk til platen og inkuberes ved 37 grader i 45 minutter.

Åpne tetningsplatefilmen, rist av løsningen i platen godt, tilsett 300 ul arbeidskonsentrasjonsvæske til hver brønn, og kast deretter væsken i brønnen. Gjenta trinnene ovenfor 5 ganger, og klapp til slutt tørr på et rent absorberende papir.

⑤ Legg til 100 ul substratoppløsning til hver brønn, dekk til platen og inkuberer i 10 minutter ved 37 grader unna lys.

⑥add 50 ul stoppløsning til hver brønn, og bestem resultatet innen 5 minutter.

Trinn 2 Resultattolkning

OD450 -verdien for hver brønn ble lest på 96- brønnen mikroplateleser.

2.1 Validering

Den gjennomsnittlige OD450Nm -verdien av negativ kontroll var<0.15 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Beregningsmetode

For hver prøve, beregner S/P som følger ved å bruke de korrigerte prøven og kontrollverdiene:

2.3 Resultattolkning

Når s/p<0.15, it is judged as negative.

Når S/P større enn eller lik 0. 25, blir det bedømt som positivt.

Når 0. 15 mindre enn eller lik S/P<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Populære tags: Fot- og munnsykdomsvirus-O Antistoff ELISA Kit, Kina Fot- og munnsykdomsvirus-O Antistoff ELISA Kit Leverandører, produsenter, fabrikk