Brucella Antistoff Elisa Kit

Spesifikasjon

 

Testprosedyrer og tolkning

 

Trinn 1 Testprosedyre

1.1 Vaskeløsningsforberedelse

WOrkingskonsentrasjon wAshing væske:Før bruk skal vaskeoppløsningen gjenopprettes til romtemperatur (20-25 grad) og ristet jevnt for å gjøre den ensartet. Fortynn 20 ganger den konsentrerte vaskeoppløsningen med renset vann (for eksempel tilsettes 5 ml konsentrert vaskingløsning til 95 ml renset vann), bland godt, og den fortynnede vaskevæsken kan lagres ved 2-8 grad i 7 dager.

1.2 Prøveforberedelse

①Hwhole Animal Blood ble tatt, sentrifugert ved 4000 o / min i 10 minutter, og supernatanten ble samlet. Serum kan også koaguleres naturlig uten hemolyse.

Når prøvestørrelsen er stor, for å sikre at den eksperimentelle reaksjonstiden er konsistent. Bland serumprøven med antistoffarbeidsløsningen ved 1: 1 i fortynningsplaten (70UL serumprøve + 70 ul antistoffarbeidsløsning). Den negative kontrollen og positiv kontroll er den samme som serumprøven.

1.3 Testprosedyre

Ta enzymetikettens mikroplate (i henhold til antall prøver, kan demonteres og brukes flere ganger), sett opp to brønner hver for negative og positive kontroller, tilsett 100ul av den premixerte blandingen til enzymetiketten mikroplat. Rist prøven forsiktig i brønnen, ved å bruke tetningsplatefilmen for å dekke platen, og inkuberes ved 37 grader i 30 minutter.

Åpne tetningsplatefilmen, rist av løsningen i platen godt, tilsett 300 ul arbeidskonsentrasjonsvæske til hver brønn, og kast deretter væsken i brønnen. Gjenta trinnene ovenfor 5 ganger, og klapp til slutt tørr på et rent absorberende papir.

③Dilutert enzymkonjugat:Fortynn enzymetkonjugatet (50 ×) 50 ganger (for eksempel: 20UL -enzymkonjugatkonsentrat + 980 UL Fortyuent 1, beregnes den spesifikke mengden som kreves i henhold til antall testprøver), bland godt og sett til side.

Bad 100 ul enzymkonjugat til hver brønn, dekk til platen og inkuberes ved 37 grader i 30 minutter.

⑤ Vask enzymplate, den spesifikke operasjonen er den samme som ovennevnte ②.

⑥ Legg til 100 ul substratoppløsning til hver brønn, dekk til platen og inkuberer i 10 minutter ved 37 grader unna lys.

⑦add 50 ul stoppløsning til hver brønn, og bestem resultatet innen 5 minutter.

 

Trinn 2 Resultattolkning

 

OD450 -verdien for hver brønn ble lest på 96- brønnen mikroplateleser.

2.1 Validering

 

Den gjennomsnittlige OD45 0 nm -verdien av positiv kontroll var <0,35 og den gjennomsnittlige OD450Nm -verdien av negativ kontroll/positiv kontroll var større enn eller lik 3,5, de eksperimentelle resultatene var gyldige. Ellers bør testen gjentas.

2.2 Beregningsmetode

For hver prøve, beregner du PI (blokkering av) som følger ved bruk av de korrigerte prøven og kontrollverdiene:

2.3 Resultattolkning

Når PI <20%, blir det bedømt som negativ.

Når Pi> 30%, blir det bedømt som positivt.

Når 20% mindre enn eller lik Pi mindre enn eller lik 30%, blir det bedømt som mistenkelig, og foreslår å gjenta prøvetaking og teste en uke senere.

Populære tags: Brucella Antistoff Elisa Kit, China Brucella Antistoff ELISA Kit Leverandører, produsenter, fabrikk